De Mesdag Collectie presenteert de unieke kunstcollectie van de internationaal gevierde kunstenaar Hendrik Willem Mesdag en zijn echtgenote Sientje Mesdag-Van Houten. In de tweede helft van de negentiende eeuw brachten zij een belangwekkende collectie schilderijen, tekeningen en kunstnijverheid bijeen, die nog steeds aan de Laan van Meerdervoort in de historische omgeving te zien is.
Het museum is beroemd om de collectie Franse meesterwerken van de School van Barbizon, een van de grootste en belangrijkste ter wereld, en de indrukwekkende verzameling schilderijen, aquarellen en tekeningen van de Haagse School.